中国兽医学报最新期刊目录
基于正交试验的Pochonia chlamydosporia原生质体电转化体系优化及生物学功能分析————作者：郝陆瑶;刘泓佑;赵逢淼;马园;马成宇;李政忆;王瑞;
摘要：该本研究旨在构建高效的厚垣普可尼亚菌（Pochonia chlamydosporia）原生质体遗传转化体系，以促进基因转化和遗传改造及后续的生物学功能研究。通过正交试验，本研究系统优化了电转化过程中电压、稳渗剂、电脉冲时间、核酸质量浓度和原生质体浓度等关键因素。结果显示，最佳的电转化条件为：电压250 V、稳渗剂为0.6 mol/L蔗糖溶液、电脉冲时间10 ms、质粒浓度1%、原生质体浓度1 × ...
驴源马链球菌马亚种sagA和aroA双基因缺失菌株的构建及其生物学特性分析————作者：刘冰;刘广源;高楠楠;丁召亮;于杰;魏传禄;李海静;王华;董世山;董建宝;
摘要：马腺疫是规模化养驴场最主要的高发疫病之一，严重影响着我国驴产业的健康发展，疫苗接种是该病防制的有效途径，而我国目前尚没有该病的驴源菌株弱毒疫苗。本研究旨在为马腺疫弱毒疫苗的研发提供侯选菌株。本研究以驴源马链球菌马亚种野毒株为研究对象，利用同源重组基因敲除技术，将编码5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶的aroA基因以及编码链球菌溶血素S毒素原的sagA基因进行人工敲除，获得双基因缺失菌株并对其毒力...
实时荧光LAMP法快速检测转基因猪的外源基因hCD46————作者：张真;李津;苗健;刘巍;李刚;李华斌;李春和;温丽娟;赵瑞利;范君文;赵忠鹏;
摘要：为了建立快速、简便、准确的检测转基因猪外源外源基因的方法。试验采用了实时荧光LAMP法的检测转基因猪的外源基因。针对hCD46基因设计6条特异性引物，在63℃条件下，检测时间在45 min以内完成核酸扩增。通过实时荧光监测仪监测LAMP扩增中SYBR Green I染料在紫外荧光下激发的荧光信号强度，作为hCD46基因扩增的判定依据。结果表明：构建的方法灵敏度高，最小可检测低至4.4×10 金银花提取物调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制犬乳腺肿瘤细胞活性及机制研究————作者：孙真真;张玉珠;赵艺鸿;谢光洪;郑慧华; 摘要：旨在探讨金银花提取物对犬乳腺肿瘤细胞的抗肿瘤活性及其潜在机制，本研究首先通过CCK-8法评估其对正常细胞（犬乳腺上皮细胞PETCC3059、小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev）及肿瘤细胞（CHMm、CHMp）的毒性差异。结果显示，正常细胞在0～20 g/L质量浓度下未表现毒性，PETCC3059和EpH4-Ev分别在40、60 g/L时活性受抑；而肿瘤细胞CHMm和CHMp在5、2.5 g/L时即出现... 斯氏艾美耳球虫ASP重组腺相关病毒的制备及体外活性检测————作者：李亚欢;李超凡;陈梦阁;李新;王晓岑;张旭;宫鹏涛;张楠;李建华; 摘要：制备可表达斯氏艾美耳球虫天冬氨酸蛋白酶的重组腺相关病毒（rAAV9-ZsGreen1-EsASP），并探究其体外活性。通过PCR扩增EsASP基因，利用同源重组法将重组腺相关病毒载体pAAV-IRES-ZsGreen1与EsASP基因相结合，构建pAAV-ZsGreen1-EsASP表达质粒；采用脂质体转染法将pAAV-ZsGreen1-EsASP表达质粒、pHelper和pAAV-RC9质粒共转... DNA损伤应答调控新城疫病毒复制的研究————作者：董传荣;金海林;刘新鑫;闫巍文;李虹瑾;尹仁福; 摘要：新城疫（Newcastle disease， ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus， NDV）引发的一种高度传染性烈性禽病，持续威胁全球家禽养殖业。尽管目前已广泛实施疫苗接种，但散发疫情依然频发，提示其致病机制尚未被完全阐明，需探索新的防控靶点。DNA损伤应答（DNA damage response， DDR）是宿主维持基因组稳定的重要机制，近年来被发现与病毒感染密... 检测猪瘟病毒Erns蛋白抗体的双抗原夹心化学发光方法的建立————作者：杨梓涵;刘钟迪;张艺潇;左青山;宋启超;王遵宝;郭艺迪;涂长春;龚文杰; 摘要：为建立一种特异性强、灵敏度高、操作高效便捷的检测猪瘟病毒（classical swine fever virus， CSFV）Erns蛋白抗体的方法，以便鉴别E2亚单位疫苗免疫和流行毒株感染的抗体。本研究将昆虫杆状病毒表达系统表达纯化的Erns蛋白，分别与偶联于固相载体-羧基磁珠和辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase， HRP），... 非洲猪瘟病毒p37重组蛋白对小鼠免疫原性分析————作者：黄颖;翟文竹;陶春豪;何宇恒;王振;储媛媛;庞忠宝;朱鸿飞;贾红; 摘要：旨在探究非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）p37重组蛋白对小鼠的免疫原性。使用p37重组蛋白作为抗原，腹部皮下免疫C57BL/6J小鼠。首免后21 d进行二免，ELISA检测血清特异性抗体水平；采用多因子技术检测血清中细胞因子水平；二免7 d分离小鼠脾淋巴细胞，通过ELISpot检测p37重组蛋白刺激后分泌IFN-γ的脾淋巴细胞数量，并用流式细胞术检测C... 猪繁殖与呼吸综合征病毒环状RNA疫苗的构建及环化条件优化————作者：陶春豪;黄颖;王振;姜一曈;朱鸿飞;贾红; 摘要：为构建一种环化率高、便捷有效的环状RNA(circRNA)疫苗制备体系，本研究采用基于Ⅰ型内含子的内含子外显子置换(permuted intron exon, PIE)策略，构建了绿色荧光蛋白(EGFP) circRNA,并对体外转录后(IVT)、一次环化后(IVC1)、二次环化后(IVC2)的RNA进行了circRNA环化率的比较，在对circRNA进行纯化后将构建的circRNA体系应用于猪繁... 猪流行性腹泻病毒纤突蛋白抗原表位的表达及其纳米抗体的筛选————作者：胡湘云;陈少梅;宣泽义;罗蒙和;潘锐;杨楷;奚玉莲;曹艳红; 摘要：为制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)纤突蛋白(S)抗原表位的纳米抗体，并验证其反应活性。本研究采用人工合成PEDV S蛋白抗原表位区域SN,通过原核表达系统构建表达载体pCZN1-SN,对SN片段进行原核表达，经Ni-NTA层析柱进行纯化，利用噬菌体展示技术从天然纳米抗体文库中靶向筛选SN纳米抗体，经过3轮亲和筛选，获得阳性克隆并测序，选取反应活性最强的1株克隆进行原核表达，经Western blo... TPCK胰酶对猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上增殖的影响————作者：张大妹;杨柳;高广亮;李绍梅;罗杰;付利芝;余远迪;许国洋; 摘要：旨在探究甲苯磺酰基-L-氨基联苯氯甲基酮（TPCK）胰酶对猪流行性腹泻病毒（PEDV）在Vero细胞上增殖规律的影响。试验通过在病毒增殖过程添加TPCK胰酶和常规胰酶，利用RT-qPCR技术，分析病毒吸附和入侵Vero细胞的变化规律，并通过生长曲线绘制、IFA鉴定和细胞活性检测，解析PEDV在Vero细胞上的复制能力变化。结果显示，TPCK胰酶和常规胰酶最适质量浓度分别为1、6 mg/L;PEDV... 2022-2023年河南省猪圆环病毒2型流行病学调查及其在猪场内的分布————作者：李振坤;袁晋;路浩;邢金超;李阳;董芳婷;徐盟龙;张越;魏战勇; 摘要：为了解2022-2023年河南省猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)的流行变异及其在猪场内部的分布情况，本研究使用荧光定量PCR方法对河南省18个市区规模化猪场的1 206份猪血液样品和2个PCV2阳性猪场共318份猪只及环境样品进行了PCV2检测，并对阳性样品进行ORF2基因测序和遗传进化分析。结果显示，河南省PCV2阳性率为7.05%(85/1 20... 猪源致病性大肠杆菌分离鉴定及毒力基因检测和耐药性分析————作者：刘硕琦;刘莹;孟子薇;张静雯;范京惠;左玉柱; 摘要：为了解河北省部分地区猪源大肠杆菌的致病性、耐药性及其生物学特性，本研究从猪场采集的仔猪腹泻粪便进行大肠杆菌分离鉴定，并对分离菌株进行药敏试验、生物被膜形成能力检测、致病性试验、毒力基因检测、耐药基因检测以及系统进化分群鉴定。结果显示，从腹泻仔猪粪便中共分离到35株致病性大肠杆菌，其中多数为多重耐药菌，至少对3种抗生素耐药。分离菌对阿莫西林（88.57%）、氨苄西林（88.57%）、强力霉素（88.... 不同来源鸡源大肠杆菌的分离鉴定、分子分型及耐药性致病性分析————作者：王佳宇;郝小静;孙美玲;刘文华; 摘要：为了解大肠杆菌在不同种群鸡的感染状况，本试验对烟台地区3个孵化场的1日龄雏鸡、死胚和9个肉鸡养殖场的临床病死鸡以及淘汰种鸡的1 950份样品进行了大肠杆菌的分离鉴定；通过脉冲场凝胶电泳对分离菌株进行同源性分析；应用PCR进行毒力基因和血清型鉴定；通过接种鸡胚确定致病性；通过药敏试验确定菌株耐药性。结果显示，共分离出116株大肠杆菌，其中成功分型的97株划分为66个带型；经PCR检测出15种毒力基因... 1株多源曼氏杆菌TbpB定点突变与免疫原性————作者：闫智豪;朱玉红;时间;马兴懌;甘玲;郭建华; 摘要：多源曼氏杆菌（Mannheimia varigena,M.varigena）是引起牛呼吸道疾病的重要病原体。转铁结合蛋白B（transferrin binding protein B,TbpB）是一种直接暴露于细胞外膜的脂蛋白，不仅参与细菌铁离子代谢，还是一种重要的毒力因子。为探究M.varigena的TbpB与牛转铁蛋白（bovine transferrin, bTf）结合关键氨基酸残基突变对其... 牛多杀性巴氏杆菌交叉免疫保护性抗原蛋白PmCQ2-5175的筛选及效果评价————作者：熊盼;黄艳澜;刘思渝;杨柳;赵光夫;李能章;何芳;彭远义; 摘要：A型多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是引起牛肺炎等呼吸系统疾病的重要病原菌，严重制约我国养牛业的健康发展。目前，主要通过疫苗接种预防该病，但由于Pm血清型众多，导致疫苗交叉免疫保护作用较差。因此，研发具有交叉保护作用的疫苗对防控Pm感染具有重要意义。本课题组前期研究发现，PmCQ2Δcra对A、B、F等不同荚膜血清型菌株(PmA、PmB、PmF)均具有良好的免疫保... 中国山羊源睡眠嗜组织菌(Histophilus somni)的分离鉴定及致病性————作者：李富祥;高华峰;赵文华; 摘要：旨在对云南省1起山羊呼吸道疾病进行细菌病原鉴定，从患病山羊的肺脏样品中分离到3株革兰阴性小球杆菌（YN240861、YN240862和YN240863）,并对其进行了生化鉴定、16S rDNA基因序列相似性与遗传进化分析、致病性试验以及药物敏感性检测。鉴定结果显示，3株分离株的生化特征与睡眠嗜组织菌（Histophilus somni,Hi.somni）模式菌株ATCC 43625T 长沙地区养殖场利奈唑胺耐药肠球菌的流行及基因组特征————作者：刘建勤;张建超;陈智;杨辉;朱红刚;漆亮;陈小军; 摘要：为了解湖南省长沙地区养殖场肠球菌的耐药情况，采集猪、牛、鸡和鹌鹑的肛拭子、粪便及环境样本共596份，进行肠球菌分离和质谱鉴定。采用琼脂扩散法测定菌株对10种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),并通过全基因组测序(WGS)分析多位点序列分型(ST)、耐药基因及毒力基因的分布情况。结果显示，共分离出272株肠球菌，分离率为45.6%。分离菌株对头孢西丁和头孢噻呋耐药率最高(68.9%和58.5%),其次... 鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体双重TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用————作者：董志民;王利丽;田向学;路超;张莉;鄢明华; 摘要：为快速检测与鉴别鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS),本研究根据NCBI数据库中2种病原的16S rRNA基因序列的保守区，分别设计引物和TaqMan探针，通过优化反应条件，建立了一种可同时检测MG和MS的双重TaqMan荧光定量PCR方法，并对其特异性、敏感性、重复性和可靠性进行了验证。结果显示，该方... 脑心肌炎病毒样颗粒疫苗的制备及免疫保护效果评价————作者：张艳芳;朱琼;付杰;方耀辉;靳佳音;张丹娜;邓菲;曹胜波; 摘要：脑心肌炎是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一种以脑炎、心肌炎为主要临床特征的人畜共患传染病。为探索有效的预防措施，本研究利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，将EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭载体中，构建重组杆状病毒Ac-P12A-3C,并大量表达和纯化了EMCV病毒样颗粒(EMCV-VLPs),透射电镜观察显示，EM... 中国兽医学报来自网友的投稿评论：
